许海委    徐宝山    杨强    李秀兰   马信龙   夏群   张春秋   伍耀宏

目的 用脱细胞脱钙骨基质和脱细胞髓核基质构建新型一体化纤维环-髓核双相支架，并进行理化检测，探讨其作为组织工程椎间盘支架的可行性。 方法 取猪股骨近端松质骨，塑形成外径10 mm、内径5 mm、厚3 mm的骨环，经脱脂、脱钙、脱细胞处理制备成纤维环相支架；取猪尾髓核组织，Triton X-100和脱氧胆酸联合脱细胞后粉碎、离心，制备脱细胞髓核基质；将制备的脱细胞髓核基质注入纤维环相支架中央，冷冻干燥，联合应用紫外照射和碳化二亚胺进行交联，制备一体化纤维环-髓核双相支架。通过大体观察、HE染色、扫描电镜观察支架结构；测定支架的孔隙率、吸水率、压缩弹性模量；MTT法检测25%、50%、100%支架浸提液对新西兰大白兔脂肪来源干细胞（adipose-derived stem cells，ADSCs）增殖的影响；将ADSCs接种到支架上，活/死细胞染色观察细胞在支架上的活性。 结果 大体观察支架呈乳白色；HE染色可见支架均质红染，无细胞成分残留；扫描电镜可见外层纤维环相支架孔径大小均匀一致，孔隙相互贯通，中央脱细胞髓核基质微丝相互连接，形成均匀网状结构，交界处连接紧密。纤维环相支架孔径为（343.00 ± 88.25）?m，一体化纤维环-髓核双相支架孔隙率为82.98% ± 7.02%、吸水率为621.53% ± 53.31%，压缩弹性模量为（89.07 ± 8.73） kPa。经MTT测定支架浸提液对ADSCs增殖无影响；活/死细胞染色可见细胞在支架上生长良好，无死细胞。 结论 用脱细胞脱钙骨基质和脱细胞髓核基质构建的一体化纤维环-髓核双相支架具有合适的孔径和孔隙率且无毒，力学性能与人正常椎间盘接近，是构建组织工程椎间盘的理想支架载体。