目的 介绍一种改良的人汗腺上皮细胞体外分离培养及纯化的方法。
    方法 将人全厚皮在无菌条件下剪成1mm2大小的碎块,然后用胶原酶Ⅱ(2mg/ml)在37℃条件下消化3h,微量加样器在倒置显微镜下吸取游离的汗腺组织移入含有5%胎牛血清的培养基中进行原代培养,7天后用含有0.25%的胰酶消化4min,去除混杂的成纤维细胞。
    结果 皮肤组织块在37℃条件下消化3h,与传统方法4℃过夜(12h以上)相比,节约了时间,且组织的消化程度和细胞的生长状态都优于传统的分离方法。利用汗腺细胞和成纤维细胞对胰酶的敏感性差异,我们对汗腺细胞进行纯化,发现0.25%的胰酶消化4min可以去除90%的成纤维细胞,而汗腺细胞的状态基本不受影响。
    结论 创造了一种改良的人汗腺上皮细胞的分离培养及纯化方法,此方法克服了人汗腺细胞分离难、分离时间长以及成纤维细胞污染等难题。