目的 探索一条非转基因的途径诱导表皮细胞去分化形成表皮前体干细胞。
    方法 采用bFGF诱导表皮细胞去分化形成表皮前体干细胞,免疫细胞化学染色法、流式细胞检测技术、RT-PCR法以及免疫荧光染色技术检测bFGF诱导培养后表皮细胞的表型及功能改变。同期分离培养的人在体表皮干细胞作为本次实验的阳性对照。
    结果 免疫细胞化学染色表明bFGF诱导培养后,实验组细胞中β1-integrin、CK19、CK14的表达增强,而CK10的表达明显降低。流式细胞技术检测显示bFGF诱导后实验组、对照组及阳性对照组中α6+CD71-、α6+CD71+及CD71表达阳性的细胞亚群分别占被检测细胞总数的13.24%、58.26%、23.12%,0.12%、3.06%、51.50%及37.49%、45.13%、5.86%。RT-PCR 检测结果显示,实验组中β1-integrin、CK19、CK14的mRNA 转录水平明显上调,而CK10的mRNA 表达则明显下降。虽然β1-integrin、CK19和CK10的表达在实验组和阳性对照组中没有显著性的差异(p>0.05),但CK14在实验组中的表达则显著性增高达1.4倍左右(p<0.05)。此外,免疫荧光染色结果显示端粒酶逆转录酶在去分化来源表皮干细胞和在体表皮干细胞中存在着亚细胞位点分布差异。
    结论 bFGF能够诱导表皮细胞去分化并且从新获得干细胞的潜能。虽然这些去分化来源的表皮干细胞在形态和功能上更加接近短暂扩增细胞,但是该方法期待能为表皮细胞去分化理论的深入认识以及探询一条高效、安全的iPS细胞制备途径提供实验参考。