王涛       马信龙       张晓林      臧加成      马剑雄      韩超       王玉龙

摘要： 目的 筛选人退变腰椎间盘特异性表达microRNA的靶基因,并探讨JNK信号转导通路在椎间盘退变(intervertebral disc degeneration,IVDD)分子生物学机制中发挥的作用.方法 对获取的8份腰椎退行性疾病患者(男6例,女2例；44～68岁)手术髓核组织和3份腰椎骨折患者(男3例,17、18、22岁)正常髓核组织依次进行髓核细胞分离、培养、染色鉴定、提取标本总RNA;采用microRNA微阵列基因表达实验和分析技术筛选差异表达的microRNAs并采用实时qPCR技术对其中高表达者进行验证；综合MicroCosm v5、TargetScan 5.1和microRNA.org等三个数据库的靶基因信息,取交集分析预测靶基因,并分析与差异基因或靶基因功能显著相关的生物信号通路；定量PCR方法验证筛选结果.结果 退变组中microRNA-513a-5p和microRNA-494呈显著高表达,比值分别为2.222 2和2.948 5,并与验证结果相吻合；预测靶基因分别为MKK4和JunD,此两种靶基因分别位于JNK信号通路的上、下游,均参与JNK信号传导.结论 microRNA-513a-5p和microRNA-494在退变椎间盘中具有高表达,其对应的靶基因为MKK4和JunD.JNK信号传导通路在IVDD的发病机制中可能发挥重要正负反馈调节作用.